建设银行企业网上银行的U盾操作指南如下：
1.首先，插入主管U盾到电脑主机，确认证书后点击【确认】，输入密码进入主界面。
2.在主界面上，选择【进入操作页面】，然后点击【转账业务】，接着选择【转账制单】下的【单笔付款】选项。
3.在付款页面，填写收款人和付款人信息，以及付款金额，点击【下一步】，此时需要输入交易密码并确认。
4.制单成功后，复核人员使用复核U盾，同样流程：输入密码、选择【转账业务】，在【转账复核】的【按笔复核】中查看并选择需要复核的款项，输入密码完成复核。
5.提醒，U盾证书服务期为五年，临近到期前一个月系统会提示更新。如不慎遗失，应及时到银行网点冻结或更换证书。
通过以上步骤，主管、制单和复核三个角色在企业网上银行中的操作流程已清晰展示。请确保在规定权限内进行操作，保障账户安全。如需进一步操作指导，可参考百度百科中的U盾相关资料。